細(xì)胞培養(yǎng)行業(yè)的用水污染源有著多種多樣的因素,如細(xì)菌、霉菌、酵母等。這些污染物通常都在肉眼可見的范圍內(nèi),或是光學(xué)顯微鏡下能夠看見的。然而化學(xué)來源以及污染源頭都是其他的生物媒介進(jìn)行影響同時也在培養(yǎng)過程中影響細(xì)胞生長以及形態(tài)方面,但是這些無法被裸眼觀察出來,因此細(xì)胞培養(yǎng)用水中不含微生物、內(nèi)毒素、無機(jī)離子以及各類有機(jī)復(fù)合物等方面都無法觀察到。
本實(shí)驗(yàn)的目的是為了評估艾柯純水系統(tǒng)生產(chǎn)的超純水是否能夠安全無恙地輕松用于細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用。在本研究中,我們以即用型培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞作為對照,同時分別用純水處理設(shè)備生產(chǎn)廠家生產(chǎn)出來的水(UF水)和RO水來配制粉末培養(yǎng)基。在本應(yīng)用指南中所使用的RO水?dāng)?shù)據(jù)是通過新一代高級系統(tǒng)的舊款模型而獲得的。每個培養(yǎng)批次的結(jié)果用于評估由艾柯純水處理設(shè)備生產(chǎn)廠家系統(tǒng)生產(chǎn)的水是否適合用于細(xì)胞的培養(yǎng)。
本實(shí)驗(yàn)中所使用的PER.C6細(xì)胞系來源于人成視網(wǎng)膜細(xì)胞,如今也應(yīng)用于重組蛋白的表達(dá)和單克隆抗體(Mab生產(chǎn))的制備,以及用于治療性蛋白和單克隆抗體的生產(chǎn)。
本實(shí)驗(yàn)結(jié)果清楚地顯示了用UF水配制的粉末培養(yǎng)基市場上在售的即用型培養(yǎng)基更加適合細(xì)胞系的培養(yǎng)。細(xì)胞系在用UF水配制的培養(yǎng)基中培養(yǎng)后的生長特征與對照組中用即用型培養(yǎng)基培養(yǎng)后的特征相似。此外,我們還觀察到當(dāng)實(shí)驗(yàn)在中進(jìn)行時,細(xì)胞系樣品在用UF水配制的培養(yǎng)基中培養(yǎng)與用RO水配制的培養(yǎng)基中培養(yǎng)相比,細(xì)胞生長更加良好。在這項(xiàng)實(shí)驗(yàn)中,細(xì)胞密度基本都變得很高,而O2不再是限制性因素。因此我們得出結(jié)論,RO水中因?yàn)橛懈邼舛鹊膬?nèi)毒素或無機(jī)鹽,因此影響了細(xì)胞生長。
這些實(shí)驗(yàn)結(jié)果都通過在中培養(yǎng)細(xì)胞系而獲得的單抗產(chǎn)量得到進(jìn)一步驗(yàn)證與體現(xiàn)。細(xì)胞系在用實(shí)驗(yàn)室超純水配制的培養(yǎng)基樣品中培養(yǎng)能夠獲得最高的單抗產(chǎn)量,對照組(使用即用型培養(yǎng)基)的產(chǎn)量稍低。這兩種情況的單抗產(chǎn)量都不同于RO水樣品,在RO水樣品中培養(yǎng)后單抗產(chǎn)量反而下降。